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PCR法对男性胎儿早孕期检测
发布日期:2022-08-05     浏览次数:20
核心提示:3)实时定量PCR扩增 PCR引物由大连宝生物生物公司合成,引物序列见表2, 反应在96孔PCR板中进行。选取Y染色体上特异性序列DYS14基因作为男性胎儿标志物
 

3)实时定量PCR扩增 PCR引物由大连宝生物生物公司合成,引物序列见表2, 反应在96孔PCR板中进行。选取Y染色体上特异性序列DYS14基因作为男性胎儿标志物, 采用PCR进行扩增,同时标记荧光,以(3-globin基因作为阳性内对照,蒸馏水空白对照。 在冰上配制20ul体系PCR反应液表3。根据引物的Tm平均值上下波动、.3〜4°C,作温度梯 度,根据扩增曲线和熔解曲线,确定目的和内参基因的相同最适反应温度。PCR扩增循 环参数的设置见表3,每个样本基因均做复孔。检测仪器自动计算出CT值(扩增产物的 荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环数)。为减少外源性污染可能,所有操作均由同一个女性完成。

 
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